茶多酚检测

一、检测方法

‌福林酚法‌

‌原理‌：茶多酚与福林酚试剂在碱性条件下反应生成蓝色化合物，吸光度与含量成正比（最大吸收波长765nm）。

‌步骤‌：

样品经70℃甲醇水溶液提取后离心；

加入福林酚试剂显色，分光光度法测定；

以没食子酸为标准物质定量。

‌酒石酸亚铁比色法‌

‌原理‌：茶多酚与酒石酸亚铁形成紫红色络合物（检测波长540nm），适用于茶叶、茶饮料等样品。

‌优化方案‌：

奶茶等浑浊样品需调整沉淀剂（如乙腈+盐酸或4%乙酸），提高过滤效率和准确性；

使用磷酸盐缓冲液（pH7.5）稳定反应体系。

‌高效液相色谱法（HPLC）‌

‌应用‌：分离茶多酚单体（如儿茶素、表没食子儿茶素），色谱柱选用Zorboax Eclipse XDB-C，流动相为甲醇-水梯度洗脱。

‌优势‌：灵敏度高（检出限0.5μg/g），可同时分析多种组分。

‌其他方法‌

‌高锰酸钾滴定法‌：通过氧化还原反应计算含量，操作简便但终点判断易偏差；

‌毛细管电泳法‌：适用于快速分离茶多酚单体。

二、仪器与试剂

‌检测方法‌          ‌          核心仪器‌                ‌          关键试剂‌

福林酚法          分光光度计、离心机    福林酚试剂、没食子酸标准品

酒石酸亚铁法   分光光度计、水浴锅    酒石酸亚铁溶液、磷酸盐缓冲液

HPLC法            高效液相色谱仪          甲醇、乙腈、茶多酚单体标准品

三、执行标准

‌福林酚法‌：GB/T 8313-2018（茶叶）；

‌酒石酸亚铁法‌：GB/T 21733-2008（茶饮料，茶多酚≥200mg/kg）；

‌HPLC法‌：ISO 14502-1:2005（国际标准）。

四、注意事项

‌样品处理‌

茶叶需研磨至40目以下，提取温度70℃（防止热敏成分分解）；

含乳制品样品需离心或过滤去除脂肪/蛋白干扰。

‌干扰因素‌

福林酚法易受还原性物质（如维生素C）干扰，需优化前处理；

酒石酸亚铁法中乙酸过量会导致pH不稳定，影响结果准确性。

‌校准要求‌

分光光度计需定期校准标准曲线（误差≤5%）；

HPLC流动相比例需根据目标物极性调整。